產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4347 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
塞皮克病毒PCR檢測試劑盒供應 | Sepik VirusRTPCR | BKP4347 |
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:塞皮克病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
5α-Androstanedione 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2 錳過氧化物酶(MnP)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
5α-Androstane-3β,17β-diol 中文名:5α-雄烷二醇 分子式:C19H32O2 雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
5-O-Ethylcleroindicin D 中文名: 分子式:C10H16O4 雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 100管/96樣
5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 胰島素樣生長因子結合蛋白5 英文名稱: human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGFBP5
5-Hydroxymethylfurfural 中文名:5-羥甲基糠醛 分子式:C6H6O3 胰島素 英文名稱: Human Insulin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: INS
兔固(ALD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Aminoindazole 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0%
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit ELISA. 96T/48T 4-Hydroxysapriparaquinone 120278-25-3 中文名: 分子式:C20H26O4 度:% 關鍵詞: 紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體elisa試劑盒 兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 81053-14-7 中文名: 分子式:C9H14O4 度:% 關鍵詞: 千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 154127-42-1 中文名: 分子式:C10H16N2O6S3 度:98.0% 關鍵詞:
兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one 中文名: 分子式:C11H7ClN4O2
塞皮克病毒PCR檢測試劑盒供應NGF Others Human 人 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞裂解液 (陽性對照) 肌苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Inosine
角膜上皮細胞培養(yǎng)基CEpiCM-prf5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)質量規(guī)格:>98%,BR5'-AMP-Na2
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4 原髓細胞,HL-60細胞 Dami(巨核細胞細胞)滅菌唑(分析標準品,99.2%)質量規(guī)格:分析標準品,99.2% Triticonazole
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0901速滅威標準溶液(10μg/ml,u=6%)質量規(guī)格:10μg/ml,u=6%Tsumacide solution
BAMBI Others Human 人 BAMBI / NMA 人細胞裂解液 (陽性對照) 嗪氨靈(標準品)質量規(guī)格:分析標準品Triforin
人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL地布卡因質量規(guī)格:美國進口Dibucaine
MuM-2C細胞, 人眼脈絡色素瘤細胞 赭綠青霉 小鼠成纖維細胞;φ2鹽酸地布卡因-d9質量規(guī)格:美國進口Dibucaine-d9 Hydrochloride
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽)多利培南質量規(guī)格:美國進口Doripenem
LLC(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 多沙普侖質量規(guī)格:美國進口Doxapram
水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)奧沙拉秦鈉質量規(guī)格:>98%,BROlsalazine di
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。